小鼠脾脏树突状细胞的分离方法简介-自主发布-资讯-生物在线

小鼠脾脏树突状细胞的分离方法简介

作者:杭州联科生物技术股份有限公司 2015-04-12T17:39 (访问量:5125)

小鼠脾脏DC是研究最多的淋巴组织DC,其特征为组成性表达MHC-II类分子和CD11c。该细胞群可进一步分为三群:主要分布于边缘区的CD4+CD8-CD11b+DC,主要分布于T细胞区的CD4-CD8+CD11b-DC和双阴性DC----CD4-CD8+CD11b+。其中,CD8+DC表达CD1d和DEC-205。我们可以根据需要选择不同的方法将脾脏DC分选出来。

    (一)贴壁法

小鼠脾脏DC在体外可黏附于玻璃或塑料表面,但培养18-24h后,其黏附能力丧失,借此可与巨噬细胞分离。该方法无需特殊试剂,不需要进行密度梯度离心,操作简单、省时。但用此方法获取的DC数量少,纯度低,而且分离所得的DC处于不同的分化阶段,无法满足精细实验的需要。

    (二)磁珠分选法

CD11c表达于所有已知小鼠DC表面,所以将包被了磁珠的CD11c抗体与小鼠淋巴组织或非淋巴组织悬液共孵育并置于磁场后,结合了CD11c抗体的细胞将留在分选柱中,脱离磁场后可分离得到CD11c阳性的DC。该方法简单易行,若操作得当,细胞纯度可以达到95%以上。但需购置相应分选设备及试剂,花费较高。

    (三)流式细胞仪分选

DC表面表达多种相对特异性的表面标志,可根据实验需要,选用某些特定表面标志的单克隆荧光抗体作标记,明确目的细胞群,通过流式细胞仪做自动分选。
该方法可以根据多个标记进行细胞分选,弥补了MACS分选的不足,而且分离得到的DC细胞纯度更高。但是采用FCM分选目前存在的主要问题是DC的种类很多,发育的过程和表面特征标志目前尚未完全清楚。因此,在做DC分离时,必须视标本来源及目的细胞选择合适的单克隆抗体精选标记。另外,进行流式分选必须购置具有分选功能的流式细胞仪,价格昂贵,对操作人员的技术也有较高要求。




阅读原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2015040012.html

杭州联科生物技术股份有限公司 商家主页

地 址: 浙江省杭州市拱墅区祥园路108号智慧信息产业园三期三号楼13层

联系人:

电 话: 4006721600

传 真: 4006721600

Email:network@liankebio.com

相关咨询

新品速递 | 前列腺素E2(PGE2)ELISA Kit (2019-07-15T09:52 浏览数:3217)

做流式有一套|你知道的Treg,答题抽奖好礼不停 (2019-03-11T09:42 浏览数:5046)

联科生物喊你吃年夜饭啦! (2019-01-25T13:37 浏览数:6569)

在皮氏培养皿中生长的血管与人类血管非常相似 (2019-01-23T15:04 浏览数:5326)

Human ELISA Kit 推荐:人降钙素ELISA试剂盒 (2019-01-10T14:35 浏览数:5174)

联科生物新品:妊娠研究相关试剂盒 (2019-01-09T17:05 浏览数:5778)

联科生物第四季ELISA大赛——杭州站 (2019-01-04T15:33 浏览数:5998)

全血 Foxp3 实验操作步骤 (2018-12-10T09:52 浏览数:6546)

人 Treg 试剂盒操作步骤 (2018-12-06T10:03 浏览数:6008)

流式胞内染色步骤 (2018-11-12T11:34 浏览数:7785)

ADVERTISEMENT