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5’ RACE克隆miRNA转录起始位点

作者:广州莱德尔生物科技有限公司 2013-09-26T00:00 (访问量:4254)

 5’RLM-RACE利用帽子位点的特征,特性地扩增完整Ⅱ型启动子转录的RNA,确保正真起始位点的获得。pri-miRNA是细胞核内一种瞬时表达的转录本,能够很快被Drosha降解,莱德尔的技术人员经过反复摸索找到提高RACE灵敏度的方法,有效提高了5’ RLM-RACE的成功率。

服务优势: 
1、应用“去帽法”原理,可以有效的扩增cDNA5'末端全场序列;
2、采用巢式PCR法,提高了5'RACE的灵敏度和特异性,对低丰度的基因或极少量的RNA样品同样可以进行5'RACE实验;
3、采用扩增法能优越的反转录酶,是长片段的RT-PCR扩增成为可能;
4、一次反应可研究多个基因。

服务流程: 
1、根据特定基因,进行序列分析,决定研究方案;
2、抽提总RNA;
3、已知序列验证,根据设计引物扩增,验证参考序列的存在及方向;
4、5'RACE操作;
5、对获取的序列进行测序验证(克隆到载体或PCR产物直接测序);
6、分析结果,向客户提供完整的实验操作规程、实验报告、测序结果以及测序彩色峰图、引物、质粒以及含有该质粒的菌种等。

客户提供: 
        新鲜的组织或细胞材料,背景材料:RNA来源、纯度、丰度、所扩增基因的估计长度、种属情况。是否具有同源序列等,已知部分的cDNA序列及方向。插入待检5'段的质粒载体,测序报告以及实验报告。

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